1996年凭借电视剧《真空爱情记录》出道，2007年饰演《奋斗》中的夏琳而获得了一定的知名度。

　　2008年与演员文章结婚，两人育有两女，同年凭借影片《江北好人》获得长春国际电影节最佳女主角奖。

　　2011年，在国剧盛典中获2011年度最佳女演员。2012年，马伊琍成为南通城市形象宣传大使。

　　2015年，与朱亚文共同出演的《北上广不相信眼泪》荣获2015年国剧盛典年度十大影响力电视剧。2016年，与文章共同主演谍战剧《剃刀边缘》。